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高效液相色谱仪的脱气及流动相选择方法

点击次数:1883 发布时间:2019/6/12 21:48:43 下载资料

   关于高效液相仪对于它的脱气方法还有流动相选择方法不知道大家了解过没有,所以我们准备介绍一下高效液相色谱仪的脱气及流动相选择方法,如果你有兴趣的话可以一起来了解一下。

  高效液相色谱仪的脱气方法

  1、吹氦脱气法

  利用氦气在液体中溶解度比空气低的特性,在0.1MPa压力下,以约60mL/min流速通入流动相储液容器中10~15min,可以很有效地从流动相中排除溶解的空气,能排除接近80%的氧气。采用一个高效分布式喷射流装置,一体积的氦气可从流动相中将等体积的几乎全部气体排除。这意味着1L氦气通过1L流动相就可完成排气这个工作。这种脱气方法虽然好,但氦气价格较高,很少使用。

  2、加热回流法

  此法的脱气效果较好。在操作时要注意冷凝塔的冷却效率,否则溶剂会丢失,混合流动相的比例会有变化。

  3、抽真空脱气法

  此法可使用真空泵,降压至0.05~0.07MPa,即可除去溶解的气体。但是由于真空脱气会使混合溶剂组成发生变化,从而影响到实验的重现性,因此多用于单溶剂体系的简单分析。

  4、超声波脱气法

  将欲脱气的流动相置于超声波清洗器中,用超声波震荡10~20min。此法的脱气效果差。

  5、在线脱气法

  HPLC仪器均可配置专门的在线脱气机。在线脱气使用简单,低故障,有效。

  高效液相色谱仪流动相的选择方法

  高效液相色谱是目前应用多的色谱分析方法,高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。高效液相色谱的流动相通常是各种低沸点溶剂和水溶液。它是影响分离的一个非常重要因素。在实际工作中,流动相的选择和优化是确定色谱分析的主要工作。下面介绍一下高效液相色谱仪流动相的选择方法。

  1、由强到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。

  2、三倍规则 :每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量,保留因子约增加3倍,此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中,注意观察各个峰的分离情况。

  3、粗调转微调:当分离达到一定程度,应将有机溶剂10%的改变量调整为5%,并据此规则逐渐降低调整率,直至各组分的分离情况不再改变。

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