液相色谱仪开机步骤与使用方法

点击次数：4671 发布时间：2019/8/12 21:26:23 下载资料

    关于液相色谱仪不知道你有过深入了解没有，如果没有的话可以跟我们一起来了解一下液相色谱的开机步骤与使用方法，应该能对你了解它有所帮助。

      液相色谱仪的开机步骤:

　　A. 开机冲洗系统

　　(1)依次开启液相色谱仪各个模块(检测器、泵、自动进样器、柱温箱等)，打印机，电脑显示器与主机电源，开通电源后仪器各个模块会进行自检，待自检完成后，再运行工作站。

　　【注】非盐流动相：将装有流动相的溶剂瓶放置在溶剂托盘内，将沉子滤杯浸入到流动相中。逆时针旋转泵的排液阀(也称放空阀，排空阀，Purge阀)90°到180°以打开排液阀。

　　(2)工作站中设置泵流速5ml/min，冲洗2分钟且流动相管路中没有气泡。

　　(3)停泵，关闭排液阀，工作站中编辑方法并发送，平衡色谱柱(也称走基线)。

　　【注】含盐流动相：将沉子滤头浸入到含有过渡流动相(除了不含盐，配置方法同含盐流动相)的烧杯中。逆时针旋转泵的排液阀90°到180°以打开排液阀。

　　(2)工作站中设置泵流速5ml/min，冲洗2分钟且流动相管路中没有气泡。

　　(3)停泵，关闭放空阀，设置泵流速1ml/min ，冲洗色谱30min以上。

　　(4)然后停泵，再将沉子滤杯浸入到含盐流动相中。逆时针旋转泵的排液阀90°到180°以打开排液阀。

　　(5)工作站中设置泵流速5ml/min，冲洗2分钟且流动相管路中没有气泡。

　　(6)停泵，关闭排液阀，工作站中编辑方法并发送，平衡色谱柱(也称走基线)。

　　B. 快速去除系统中的气泡

　　首先要确保流动相超声20min以上;按排空的操作去除系统中气泡。

　　有时按照一般操作系统中还是会有气泡(一般是水相中的气泡造成)，可以将沉子滤头放入甲醇中先用甲醇做排空操作去除系统气泡然后再换到使用的流动相中再进行排空。

　　沉子滤头需定时清洗(尤其是走水相的沉子滤头)，具体操作方法：

　　a. 将沉子滤头从进液管中拔下。

　　b. 按照水、异丙醇、甲醇的顺序，将沉子滤头在超声波清洗器中分别清洗 10 min - 20 min。

　　c. 重新安装清洗过的沉子滤头。

　　注意：若管路中依然有气泡产生，则需更换该部件。

　液相色谱仪的使用方法

　　1、色谱柱它包括空柱和填料。空柱是内壁抛光的不锈钢管，内径为4～5mm，长100～250mm。按气相色谱法中洗涤空柱的方法洗净，用匀浆法填充固定相。将此柱装入仪器的管路中，用柱式机械往复泵输入新鲜脱气的流动相。等基线平直后可用苯、萘、菲的混合试液，用正己烷或甲醇：水为流动相测定柱效及分离度塔板数在2～3万/ml以上及分离度在1.5以上者，柱效好。

　　为防止柱污染，常用1个 50mm长，4~5mm内径，装有硅胶或立柱相同填料的保护柱接在主柱之前，以延长色谱柱的寿命。反相键合相柱用毕。必须用水充分流经，以洗去盐类、酸碱等杂质防止柱生锈及填料中杂质的积聚，再用甲醇流经洗涤使色谱柱获得再生。

　　2、流动相的洗脱方式配好经脱气的流动相放于贮液瓶中，经过有滤过头、内径2mm的聚四氟乙烯管流入高压泵进入色谱柱，zui后自检测器流出或收集或作废液回收。用流动相洗脱的方式有恒溶剂脱洗法，即自洗脱开始到结束，溶剂的配比恒定。

　　另一类为梯度洗脱法,即使溶剂的极性强度在色谱过程中逐渐增加。须按一定程序不断改变流动相的浓度配比，从而使同一个试样中组分性质相差较小的及较大的都能在一次色谱过程中很好分离，而整个色谱过程缩短。必须注意，梯度洗脱法不能用于分子排阻色谱及用电化学检测的反相液相色谱法中。

　　3、检测器适用于血药浓度的检测器有紫外线吸收，荧光发射和电化学三种。紫外检测器应用于对紫外光有吸收的药物，大多数药物分子对紫外光有吸收，故能较普遍采用，检测限有0.1μg左右。液相色谱仪有固定波长型、可变波长型及扫描器，既能使流动相停流作组分的定性定量检测，又能提高测定灵敏度，重现性较好。荧光发射检测器对能产生荧光的药物才能使用。

　　光强度增加了3~4倍，对某些药物的检测限可达pg级。电化学检测器是由一个碳糊或破碳做成的蒲层电解池。常用于检测儿茶酚胺类及有酚类基团的各种药物和代谢物。流出组分进入2μl的薄层电解池，在一暄电压下电解产生电流，放大后检测，检测限pg级。

　　4、数据处理现代液相色谱仪带有数据处理系统，除记录谱外，还能自动记录峰的保留时间，能自动积分求算峰面积，并能按照预定的程序作有关计算，报告分析结果。

　　关于液相色谱仪开机步骤与使用方法我们就介绍到这里，如果你想了解更多关于液相色谱仪的资料可以关注我们。