液相色谱仪串联质谱的检测流程方法总汇

点击次数：3628 发布时间：2020/1/7 17:53:12

如今蛋白组/代谢组学被广泛应用于生命科学领域，液相色谱仪串联质谱技术（液质联用）是蛋白组/代谢组学研究的主要手段，因此液质联用受到了医学科学的极大重视。那么今天就来了解一下液质联用的基本流程吧！

液相色谱部分由进样系统、输液系统、分离系统三个部分组成

（1）进样装置要求密封性好，死体积小，重复性好，保证中心进样，进样时对色谱系统的压力、流量影响小。

（2）输液系统最为主要的是梯度洗脱装置——有两种方式：一种称低压梯度，指常压下溶剂按一定比例混合后再由高压泵输入色谱柱，又称外梯度；另一种称高压梯度，指先用高压泵将各溶剂输入混合器混合，再送入色谱柱，也称为内梯度。

（3）分离系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。与单纯LC相比，LC-MS一般流速较低（高流速可能影响雾化效果），所以一般用窄径柱，即2 mm或2.1mm的，粒径一般为3.5μm，也有1.7μm的。

液相色谱仪分析的一般流程

（1）ESI电离：其工作原理是将液滴变成蒸汽，产生离子发射的过程中形成的溶剂由液相泵输送到ESI Probe，经其内的不锈钢毛细管流出，这时给毛细管加2－4 kv的高压，由于高压和雾化气的作用，流动相从毛细管顶端流出时，会形成扇状喷雾，使液滴生成含样品和溶剂离子的气溶胶。ESI属于最软的电离方式，通常只产生分子离子峰。适合热不稳定的极性分子，能分析小分子及大分子。

（2）四极杆质量分析器：四极杆内所包围的空间存在双曲线形电场。从离子源入射的加速离子穿过四极杆中的电场会受到电场作用，只有选定的m/z离子以限定的频率稳定的通过四极杆质量分析器，其他离子则碰到极杆上被吸滤掉，不能通过，即达到“滤质”的作用。四极杆质量分析器结构紧凑，体积小，扫描速度快，适用于LC-MS联用仪。