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从专业角度带您了解液相色谱仪具体操作步骤

点击次数:712 发布时间:2020/1/14 16:11:09

 液相色谱仪是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。

 

液相色谱仪

 

液相色谱仪的主要操作步骤:

1、过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。

 

2、对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

 

3、打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。

 

4、进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。

 

5、有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速度不要超过10ml/min。

 

6、调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,观察基线的情况。

 

7、设计走样方法。点击file,选取selectusersandmethods,可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,点击newmethod。选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,点击protocol。

一个完整的走样方法需要包括:

a、进样前的稳流,一般2-5分钟;

b、基线归零;

c、进样阀的loading-inject转换;

d、走样时间,随不同的样品而不同。

 

8、进样和进样后操作。选定走样方法,点击start。进样,所有的样品均需过滤。方法走完后,点击postrun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。

 

9、关机时,先关计算机,再关液相色谱。

 

10、填写登记本,由负责人签字。

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